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 circRNA服務

circRNA服務?
circRNA RIP实验
來源: | 作者:geneseed | 發布時間: 2017-09-03 | 16912 次浏覽 | 分享到:

RNA免疫沈澱RIP運用針對目標蛋白質的抗體把相應的RNA-蛋白質複合物沈澱下來,經過分離純化並對結合在複合物上的RNA進行測序或PCR分析。RIP可應用于研究miRNA調節靶點、RNARNPRNA結合蛋白)的互作關系等。


 

實驗流程:
1.細胞裂解
2.捕獲RNA-蛋白複合物
3.洗脫
4.檢測


實驗實例:

       以anti-SNRNP70爲目的抗體,anti-IgG爲對照抗體,在Hela细胞裂解样本中,进行免疫沈澱。免疫沈澱所得蛋白质样品,进行Western blot檢測,input样本與目的样本在约70KDa大小位置有明顯條帶,陰性對照樣本無條帶。

       免疫沈澱所得RNAU1 snRNA特異性引物,進行RT-PCR分析,input样本與目的样本可见明显的PCR産物,指示SNRNP70富集U1 snRNA


Western blot檢測:

     

RNA 檢測:

 

 

電泳跑膠圖:

 


 

PCR檢測結果